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一种喇叭虫RNA干扰表达载体与构建方法及其应用
Rights Holder中国科学院水生生物研究所
Date Available2020
Subtype发明专利
Abstract本发明公开了一种喇叭虫RNA干扰表达载体与构建方法及其应用。步骤包括:1)利用质粒pSCTGA的已知序列,获得pSCTGA质粒骨架;2)利用集胞藻PCC6803基因组DNA,通过PCR扩增C‑藻蓝蛋白β亚基的启动子;3)利用质粒L4440,通过PCR扩增质粒的多克隆位点;4)利用PCR扩增获得的DNA片段,通过同源重组的融合PCR和一步克隆法最终构建得到RNAi表达载体pSCT3C。本发明首先利用氯化钙法将含有目的基因的RNAi表达载体转染进大肠杆菌DH10B菌株,然后再采用接合转移方法将其转染进集胞藻PCC6803中,成功获得阳性单克隆藻株后,可通过喂食方式用于干扰天蓝喇叭虫中目的基因的表达。综上所述,本发明方法易行,操作方便,具有应用于其他纤毛虫基因干扰的可行性。 机器翻译
Application Date2020
Status在审
Application NumberCN202010434356.1
Open (Notice) NumberCN111471685A
IPC Classification NumberC12N15/113(2010.01) ; C12N15/82(2006.01) ; C12N15/65(2006.01) ; A01N57/16(2006.01) ; A01P7/04(2006.01)
Document Type专利
Identifierhttp://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/39562
Collection专利
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GB/T 7714
. 一种喇叭虫RNA干扰表达载体与构建方法及其应用.
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