IHB OpenIR  > 水生生物多样性与资源保护研究中心
达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存
颉璇; 厉萍; 席萌丹; 郭威; 乔新美; 杜浩; 刘志刚; 危起伟
2016
Source Publication淡水渔业
Issue5Pages:19-24
Abstract通过研究两种酶对精巢细胞的消化效果,探究抗冻剂、降温程序、糖类和卵磷脂对达氏鲟(Acipenser dabryanus)精巢细胞冻存效果的影响,获得消化冻存后高存活率的细胞。实验使用0.25%胰蛋白酶和2 mg/m L胶原酶H+500 U/m L中性酶II的组合酶对达氏鲟精巢细胞进行消化,获得不同消化时间内的活细胞数量。另外,还研究了冷冻稀释液中分别添加10%二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甲醇(MET)作为抗冻剂,采用-1℃/min慢速降温以及直接投入液氮中的快速降温方法冻存,冷冻稀释液采用D-海藻糖或同浓度D-蔗糖,以及添加5%、8%、11%卵磷脂对冻存效果的影响。结果显示:两种消化酶在同一时间消化所得的活细胞数和活细胞率无显著差异,并且都在3 h获得最多活细胞。慢速降温的冻存效果极显著地好于快速降温(P=0.01)。不同抗冻剂的保存效果差异显著,复苏后细胞相对存活率EG(51.70%±5.24%)>MET(45.09%±3.15%)>DMSO(40.18%±3.90%)。不同糖对达氏鲟精巢细胞冻存效果无显著影响;不同浓度的卵磷脂冻存效果有极显著差异。含8%卵磷脂的冻存液对细胞的冻存效果最好,细胞存活率可达(93.55±2.56)%,培养10 d后细胞数目为0 d时的3.19倍。
Subtype期刊论文
Keyword达氏鲟(Acipenser Dabryanus) 胰蛋白酶 冷冻保存 抗冻剂 卵磷脂
Department西南大学生命科学学院 ; 农业部淡水生物多样性保护重点实验室中国水产科学研究院长江水产研究所 ; 中国科学院水生生物研究所
Indexed ByCSCD
CSCD IDCSCD:5813243
Citation statistics
Cited Times:2[CSCD]   [CSCD Record]
Document Type期刊论文
Identifierhttp://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/38750
Collection水生生物多样性与资源保护研究中心
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GB/T 7714
颉璇,厉萍,席萌丹,等. 达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存[J]. 淡水渔业,2016(5):19-24.
APA 颉璇.,厉萍.,席萌丹.,郭威.,乔新美.,...&危起伟.(2016).达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存.淡水渔业(5),19-24.
MLA 颉璇,et al."达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存".淡水渔业 .5(2016):19-24.
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