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达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存
厉萍; 颉璇; 席萌丹; 郭威; 乔新美; 杜浩; 刘志刚; 危起伟
2016
Source Publication淡水渔业
ISSN1000-6907
Volume046Issue:005Pages:19
Abstract通过研究两种酶对精巢细胞的消化效果,探究抗冻剂、降温程序、糖类和卵磷脂对达氏鲟(Acipenser dabryanus)精巢细胞冻存效果的影响,获得消化冻存后高存活率的细胞。实验使用0.25%胰蛋白酶和2 mg/m L胶原酶H+500 U/m L中性酶II的组合酶对达氏鲟精巢细胞进行消化,获得不同消化时间内的活细胞数量。另外,还研究了冷冻稀释液中分别添加10%二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甲醇(MET)作为抗冻剂,采用-1℃/min慢速降温以及直接投入液氮中的快速降温方法冻存,冷冻稀释液采用D-海藻糖或同浓度D-蔗糖,以及添加5%、8%、11%卵磷脂对冻存效果的影响。结果显示:两种消化酶在同一时间消化所得的活细胞数和活细胞率无显著差异,并且都在3 h获得最多活细胞。慢速降温的冻存效果极显著地好于快速降温(P=0.01)。不同抗冻剂的保存效果差异显著,复苏后细胞相对存活率EG(51.70%±5.24%)〉MET(45.09%±3.15%)〉DMSO(40.18%±3.90%)。不同糖对达氏鲟精巢细胞冻存效果无显著影响;不同浓度的卵磷脂冻存效果有极显著差异。含8%卵磷脂的冻存液对细胞的冻存效果最好,细胞存活率可达(93.55±2.56)%,培养10 d后细胞数目为0 d时的3.19倍。
Keyword达氏鲟(Acipenser dabryanus) 胰蛋白酶 冷冻保存 抗冻剂 卵磷脂
Language英语
Document Type期刊论文
Identifierhttp://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/37269
Collection鱼类生物学及渔业生物技术研究中心_期刊论文
Affiliation中国科学院水生生物研究所
Recommended Citation
GB/T 7714
厉萍,颉璇,席萌丹,等. 达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存[J]. 淡水渔业,2016,046(005):19.
APA 厉萍.,颉璇.,席萌丹.,郭威.,乔新美.,...&危起伟.(2016).达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存.淡水渔业,046(005),19.
MLA 厉萍,et al."达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存".淡水渔业 046.005(2016):19.
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