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洪湖碘泡虫sybrgreen实时荧光定量pcr检测方法的建立及其应用
罗丹; 赵媛莉; 刘新华; 章晋勇
2020
Source Publication水生生物学报
ISSN1000-3207
Volume44Issue:2Pages:268
Abstract

洪湖碘泡虫(Myxobolus honghuensis)引起的鲫“喉孢子虫病”严重危害我国异育银鲫养殖。病原丰度是决定病害发生的最重要因素之一,因此建立洪湖碘泡虫的定量检测方法,不仅可用于异育银鲫“喉孢子虫病”的早期诊断,也可应用于养殖系统中洪湖碘泡虫的定量监测,为该病的暴发风险预警及防控措施的效果评价提供技术手段。研究根据洪湖碘泡虫的ITS基因序列,设计合成一对特异性引物HHF/R,建立了洪湖碘泡虫的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏性、重复性及应用性进行了验证。结果显示,该方法能特异性检测出洪湖碘泡虫,而与多涅茨尾孢虫、倪李碘泡虫、普洛宁碘泡虫、吴李碘泡虫之间无交叉反应;最低检测限为3.02×10~1copies/μL,灵敏性较常规PCR高出1000倍;组内和组间重复性试验的变异系数均小于2%。应用该方法可定量检出洪湖碘泡虫全生活史阶段,包括鱼体内移行发育的前孢子阶段及养殖系统环境,如池塘水样及底泥样品中分布的洪湖碘泡虫。因此,所建立的洪湖碘泡虫SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性稳定,可应用于异育银鲫全养殖阶段洪湖碘泡虫的定性、定量监测。

KeywordMyxobolus honghuensis Carassius auratus gibelio SYBR Green I real-time fluorescent quantitative PCR Monitoring 洪湖碘泡虫 异育银鲫 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR 监测
DOI10.7541/2020.032
Language英语
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Document Type期刊论文
Identifierhttp://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/36743
Collection鱼类生物学及渔业生物技术研究中心_期刊论文
Affiliation中国科学院水生生物研究所
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GB/T 7714
罗丹,赵媛莉,刘新华,等. 洪湖碘泡虫sybrgreen实时荧光定量pcr检测方法的建立及其应用[J]. 水生生物学报,2020,44(2):268.
APA 罗丹,赵媛莉,刘新华,&章晋勇.(2020).洪湖碘泡虫sybrgreen实时荧光定量pcr检测方法的建立及其应用.水生生物学报,44(2),268.
MLA 罗丹,et al."洪湖碘泡虫sybrgreen实时荧光定量pcr检测方法的建立及其应用".水生生物学报 44.2(2020):268.
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