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灭活病毒诱导牙鲆传代细胞差减cDNA文库的构建及分析
杜昌升; 张奇亚; 董彩文; 苗大利; 桂建芳
2005
Source Publication高技术通讯
ISSN1002-0470
Volume015Issue:001Pages:79
Abstract

以灭活大鳞鲆弹状病毒诱导的牙鲆(Paralichthys olivaceus)传代细胞作为检测子(tester),正常对照细胞作为驱赶子(driver),分别提取mRNA,逆转录合成双链cDNA。经两轮差减杂交,两轮抑制性PCR扩增后,取正向差减的PCR产物与T载体连接,构建抑制差减cDNA文库,随机挑取7400余个克隆,对其中4200多个克隆进行PCR扩增鉴定,发现近4000个克隆中均含有插入片段,大小在250~1000bps之间,进一步对含有插入片段的近4000个克隆进行了斑点杂交筛选,得到近668个可能含有抗病毒或与免疫相关的阳性克隆。初步的结果表明所建立的差减cDNA文库适合进一步克隆鱼类抗病毒相关新基因。

Language英语
Document Type期刊论文
Identifierhttp://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/35602
Collection鱼类生物学及渔业生物技术研究中心_期刊论文
Affiliation中国科学院水生生物研究所
Recommended Citation
GB/T 7714
杜昌升,张奇亚,董彩文,等. 灭活病毒诱导牙鲆传代细胞差减cDNA文库的构建及分析[J]. 高技术通讯,2005,015(001):79.
APA 杜昌升,张奇亚,董彩文,苗大利,&桂建芳.(2005).灭活病毒诱导牙鲆传代细胞差减cDNA文库的构建及分析.高技术通讯,015(001),79.
MLA 杜昌升,et al."灭活病毒诱导牙鲆传代细胞差减cDNA文库的构建及分析".高技术通讯 015.001(2005):79.
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