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专利名称: 含HSP70启动子和GFP的四膜虫转基因载体及制备方法和应用
发明人: 冯立芳 ; 缪炜
申请受理号: 200910062093.X
专利授权号: ZL200910062093.X
申请日期: 2009-05-15
授权日期: 2011-04-06
专利权人: 中国科学院水生生物研究所
专利类别: 发明
授予国别: 中国
公开日期: 2012-03-14
摘要:  本发明公开了一种含HSP70启动子和GFP的四膜虫转基因载体及制备方法 和应用。利用质粒rDNA-GFP,通过酶切和PCR酶切位点突变等方法,构建质 粒T-GFP;利用嗜热四膜虫基因组DNA,通过PCR扩增和克隆等方法,构建质 粒T-HSP702;利用质粒T-GFP、T-HSP702和pD5H8,通过酶切和连接最终构建 得到质粒HSP702-GFP-pD5H8。该载体含有HSP702启动子,能实现外源基因高 效表达;该载体上含有可替换的外源基因gfp,通过替换不同的外源基因,以实 现四膜虫成为一个外源基因表达系统;在巴龙霉素药物筛选作用下,该载体替换 掉四膜虫体内原有的绝大部分rDNA,使外源基因在四膜虫体内大量倍增,以实 现目标基因的遗传转化。本发明方法易行,操作方便,该载体在转染进四膜虫中 可用于环境中三丁基锡的检测。
内容类型: 专利
URI标识: http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/16646
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冯立芳;缪炜,含HSP70启动子和GFP的四膜虫转基因载体及制备方法和应用,200910062093.X,2011
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