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题名: 柱状黄杆菌乙酰辅酶A合成酶基因及其上游调控序列分析
作者: 张金 ; 邹红 ; 姚卫建 ; 聂品
关键词: 柱状黄杆菌 ; 乙酰辅酶A合成酶基因 ; 启动子 ; 核糖体结合位点
刊名: 中国水产科学
发表日期: 2011
期: 5
收录类别: CSCD
部门归属: 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室
资助者: 国家重点基础研究发展计划项目(2009CB118703)
摘要: 柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)是世界范围内危害淡水鱼类的柱形病的病原。目前对该病原菌遗传操作系统的研究进展较慢,而寻找高效稳定的启动子来调控外源基因在细菌体内的表达,有可能促进该细菌遗传操作系统的构建。本研究获得了柱状黄杆菌乙酰辅酶A合成酶基因(acetyl-coenzyme A synthetase gene,acs)的编码序列及其上游调控序列,该基因全长2 323 bp,编码635个氨基酸。通过序列分析,发现在该基因起始密码子ATG的上游存在核糖体结合位点(ribosome biding site,RBS)序列TAAAA,和启动子–7和–33的保守基序TATTTTCG和TTG。将acs的上游调控序列(promoter sequence,Pacs)置于氯霉素抗性基因(chloramphenicol acetyltransferase,cat)的上游并导入柱状黄杆菌G4株后,cat基因得以表达,并使宿主细胞产生稳定的氯霉素抗性。通过5′RACE技术,确定了外源的cat基因和内源的acs基因的转录起始位点都是位于起始密码子上游46 bp处的T。通过删减分析调控序列Pacs,发现起始密码子上游164 bp的序列是保持启动子活性所必需的。通过分析和比对32个基因的核糖体结合位点区域,在起始密码子上游10 bp处发现了RBS保守基序TAAAA。
语种: 中文
ISSN号: 1005-8737
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内容类型: 期刊论文
URI标识: http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/16065
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柱状黄杆菌乙酰辅酶A合成酶基因及其上游调控序列分析.PDF(1383KB)----开放获取--View Download

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张金;邹红;姚卫建;聂品.柱状黄杆菌乙酰辅酶A合成酶基因及其上游调控序列分析,中国水产科学,2011,(5):
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