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题名: 非同源重组方式在外源基因整合中起主要作用:转全鱼基因鲤鱼宿主基因组旁侧序列分离及其特征分析
作者: 戴军 ; 胡炜 ; 黎双飞 ; 汪亚平 ; 朱作言
会议文集: 湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会论文摘要集
出版日期: 2007
摘要: 将酶切去掉质粒骨架的转全鱼基因载体显微注射到鲤鱼受精卵中;获得转全鱼基因鲤鱼;剪取成鱼鳍条;提取基因组DNA;采用基因组步移方法分离到10个下游片段;序列分析表明;10个片段均是以串联体形式整合进宿主基因组。其中7个片段以一粘端补平;另一粘端切平的形式直接头尾相连;连接部位没有序列插入与缺失。其他3个片段为缺失终止子末端 7-50个碱基后与启动子不同部位反向相连。此外;上述10个片段中;有3个片段携带有不同长度的宿主序列;BLAST分析发现这些序列均为新序列。基于上述结果;本研究推测;转植基因可能主要采用非同源重组的机制分两步整合进宿主基因组中。首先;线性化载体以非同源末端连接为主要方式的机制形成不同形式的串联体;此后;串联体在没有显著同源的情况下整合进宿主基因组。为了验证上述推测;本研究将含有eGFP报告基因的全鱼载体线性化后;显微注射入斑马鱼受精卵中;采用TAIL-PCR分离获得16个片段;经序列分析;进一步证实了前述结论。
语种: 中文
内容类型: 会议论文
URI标识: http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/14730
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戴军; 胡炜; 黎双飞; 汪亚平 ; 朱作言.非同源重组方式在外源基因整合中起主要作用:转全鱼基因鲤鱼宿主基因组旁侧序列分离及其特征分析.见:.湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会论文摘要集,,2007,
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