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草鱼出血病病毒rna干扰的抗病研究
陈芸汪; 亚平; 胡炜; 朱作言
2009
Conference Name-
Source Publication2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编
Conference Date-
Conference Place-
Abstract小干扰RNA(smallinterferingRNA;siRA)介导的RNA干扰(RNAinterference;RNAi)是近年来快速发展的一种转录后基因沉默(post-transcrptionalgenesilencing;PTGS)方法;已经成为一种重要的基因治疗手段。本研究以草鱼出血病病毒(GCRV)外壳蛋白基因VP7为靶基因;选择3个不同的siRNA位点;构建了3个草鱼H1基因启动子驱动的shRNA表达载体pH1siGCRV(X)-CMVeGFP及其对照表达载体pH1shHK-CWVeGFP。草鱼肾细胞(CIK)的感染实验结果证实;pH1shGCRV2-CMVeGFP在细胞水平上具有较强的病毒抑制作用;抑制率达82%;以pH1shGCRV2-CMVeGFP和pH1shHK-CMVeGFP为外源基因;采用显微注射方法;获得转基因稀有鮈鲫P0代群体;3月龄转基因稀有鮈鲫和同龄非转基因组攻毒实验结果显示;非转基因组和转pH1shHK-CMVeGFP组在攻毒后第5天开始出现死亡个体;11天内全部死亡;转pH1shGCRV2-CMVeGFP组在攻毒后第5天开始出现死亡个体;第11天死亡率为20%;病程延长至20天;死亡率稳定在30%;进一步的定量PCR分析结果显示;在病程不同阶段;大部分无症状转pH1shGCRV2-CMVeGFP稀有鮈鲫脾脏、肝脏、后肠、鳃和肌肉的病毒含量远远低于转pH1shHK-CMVeGFP稀有鮈鲫和非转基因稀有鮈鲫;表明GCRV在转基因稀有鮈鲫体内的复制受到有效抑制。本研究首次在鱼类中应用RNA干扰技术抑制病毒的复制和感染;展现了RNA干扰技术在鱼类抗病育种中的广阔应用前景。
Document Type会议论文
Identifierhttp://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/14504
Collection会议论文
Recommended Citation
GB/T 7714
陈芸汪,亚平,胡炜,等. 草鱼出血病病毒rna干扰的抗病研究[C],2009.
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